Chronic Chagas disease in dogs: a phase II study to assess the performance of four chimeric Trypanosoma cruzi recombinant antigens in the serological diagnosis of dogs

Abstract

INTRODUÇÃO: Devido ao convívio próximo com humanos e papel na manutenção do ciclo de transmissão doméstica e peridoméstica, os cães são considerados os animais reservatórios/sentinela de maior importância epidemiológica para doença de Chagas (DC). Há uma correlação entre a infecção em cães e a prevalência da doença em humanos. Apesar da sua importância epidemiológica, inexiste no mercado mundial testes sorológicos comerciais para a identificação da infecção nestes animais. Assim, é evidente a necessidade do desenvolvimento de testes comerciais para esta finalidade, os quais poderão ser constituídos por preparações antigênicas contendo antígenos recombinantes quiméricos do Trypanosoma cruzi, proporcionando alto desempenho diagnóstico e elevada reprodutibilidade. Em 2019, nosso grupo investigou o potencial diagnóstico de quatro antígenos quiméricos em um estudo de fase I, encontrando elevados valores de sensibilidade e especificidade, o que nos motivou a aprofundar as avaliações e realizar o presente estudo de fase II, o qual empregou maior quantitativo amostral para avaliar o potencial diagnóstico dos quatro antígenos na detecção do T. cruzi por meio do ELISA indireto. OBJETIVO: O objetivo do estudo foi avaliar o potencial diagnóstico de quatro antígenos recombinantes quiméricos do Trypanosoma cruzi (IBMP-8.1, IBMP-8.2, IBMP-8.3 e IBMP-8.4) em imunoensaios para detecção de anticorpos IgG anti-T. cruzi em cães na forma crônica da doença de Chagas. MATERIAL E MÉTODOS: Os imunoensaios foram otimizados por checkerboard titration. No estudo de fase II, o desempenho diagnóstico dos antígenos IBMP foi avaliado utilizando 1.260 amostras caninas. Para análise de reatividade cruzada, foram utilizadas 752 amostras referentes a outras doenças infectoparasitárias. O desempenho das moléculas quiméricas foi comparado com o desempenho de testes comerciais para humanos adaptado para espécie canina (Gold Elisa Chagas). RESULTADOS: Os antígenos IBMP atingiram valores de AUC entre 89,0-97,4%. A acurácia foi entre 87,4-96%. O maior valor de sensibilidade foi atribuído ao IBMP-8.2 (90,3%), enquanto o IBMP-8.1, IBMP-8.3 e IBMP-8.4 atingiram valores de 74,8%, 72,6% e 79,6%, respectivamente. Quanto à especificidade, o maior valor foi observado para o IBMP-8.4 (99,6%), seguido pelo IBMP-8.1, IBMP-8.2 e IBMP-8.3 com 90,6%, 96,5% e 99%, respectivamente. O kit Gold Elisa Chagas apresentou uma sensibilidade de 62,3%, especificidade de 98,6% e acurácia de 89,9%. O menor índice de reatividade cruzada foi observado na IBMP-8.2 (0.9%), sendo esta molécula que mais se aproximou de um teste ideal. CONCLUSÃO: Diante do alto desempenho das moléculas IBMP, conclui-se que são moléculas promissoras para uso em imunoensaios para diagnosticar a infecção causada pelo T. cruzi em cães. O uso combinado dos antígenos é uma alternativa para aumento dos valores de sensibilidade e especificidade em estudos futuros.